Bolton 肉汤基础

Bolton 肉汤基础

Bolton Broth Base

原理和说明

动物源食品是人类弯曲杆菌感染的主要载体。迄今为止,未经巴氏消毒的牛奶是食源性空肠弯曲菌肠炎暴发中最常见的载体【1】,【2】。

弯曲杆菌属(Campylobacter)是螺菌科的1属,过去曾划归弧菌属,但它们的DNA碱基组成与弧菌不同,在降低氧气张力条件下生长的能力也不同。最初为了分离粪便中的空肠弯曲菌在营养丰富的基础培养基中添加了多种抗生素【3】。Bolton肉汤由ISO推荐用于从食物中选择性增菌弯曲菌【4】,【5】,【6】。培养基中添加了抗生素头孢哌酮,万古霉素,甲氧苄啶和两性霉素,因而具有选择性。这些抗生素是作为冻干补充剂(FD)添加的。

培养基中含有使受损弯曲杆菌恢复的营养物质,因而不需要微需氧培养。培养基中的万古霉素、头孢哌酮和甲氧苄氨嘧啶抑制革兰氏阳性和阴性菌生长,两性霉素B 减少酵母菌和霉菌的生长。

组成

配制

在500ml蒸馏水中重悬13.80g干粉培养基。加热沸腾直至完全溶解。高压灭菌(15磅121℃15分钟)。

冷却至50℃,并无菌添加1管复溶的Bolton 选择性添加剂(货号:FD231)和25ml无菌的去纤维蛋白马血裂解物。 马血可能被皂苷裂解或通过反复冻融裂解。充分混合并无菌分装到无菌试管中。

质量控制

外观

淡黄色至棕黄色均匀自由流动的粉末。

制备的培养基颜色和透明度

基础培养基为棕黄色透明或轻微不透明溶液。加入马血裂解物后,管内为红色或棕色不透明溶液。

pH值

7.20-7.60

培养反应

添加Bolton 选择性添加剂(货号:FD231)后在35-37℃下孵育4-6小时,然后在41.5℃下孵育40-48小时。

储存和保质期

干粉培养基在30℃以下密闭保存,制备好的培养基在2-8℃保存。在标签上的效期内使用。

参考文献

1. Blasser M.J., Cravens J., Powers B.W.,LaForce F.M., and Wang W. L.L., 1979, Am. J. Med., 67:715.

2. Brieseman M.A., 1984, N.Z. Med. J., 97:411.

3. Corry, Curtis and Baird. Culture Media ForFood Microbiology, Vol.34. Progress in Industrial Microbiology, 1995, Elsevier,

Amsterdam.

4. Hunt J.M, Campylobacter, F.D.ABacteriological Analytical Manual, 8th Edition (Revision AOAC, Arlington V A(1998).

5. Bolton F. J., Personal communication(1995).

6. InternationalOrganization for Standardization (ISO), 2006, Draft ISO 10272- 1:2006 (E).

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